大腸桿菌載體 E.coli Vector 大腸桿菌宿主菌株 E.coli 細菌廣宿主載體 bacateria broad range host vector 鏈霉菌載體及菌株 Streptomyces 芽孢桿菌載體 Bacillus vector 芽孢桿菌宿主菌株 乳酸菌載體 lactic acid bacteria vector 乳酸菌宿主菌株 lactic acid bacteria strain 細菌基因敲除載體 畢赤酵母載體 畢赤酵母宿主菌株 釀酒酵母載體 釀酒酵母宿主菌株 絲狀真菌載體 mold/fungi vector 乳酸克魯維酵母載體 酵母真菌基因敲除基因編輯載體 植物細胞載體 plant cell vector 農桿菌菌株Agrobacterium tumefaciens strain 植物細胞基因敲除載體 plant cell 哺乳動物細胞載體 哺乳動物細胞熒光載體 熒光素酶報告基因載體 哺乳動物細胞基因敲除基因編輯載體 雜交系統 慢病毒載體 腺病毒載體 逆轉錄病毒載體 桿狀病毒表達載體 基因干擾 RNAi載體 基因/cDNA/ORF 轉座子質粒系統 transposon 金黃色葡萄球菌載體 staphylococcus aureus 假單胞菌載體 噬菌體 phage 不動桿菌載體 雙岐桿菌載體 藻類表達載體 鏈球菌載體 厭氧菌載體 基因治療載體 大腸桿菌基因突變體菌株 細菌熒光質粒 白色念珠菌載體 體外轉錄載體 谷氨酸棒桿菌載體 釀酒酵母基因突變體菌株 線蟲載體 斑馬魚載體 Zebra fish 果蠅，昆蟲載體Drosophila 魚類細胞載體 fish cell 分支桿菌載體 克雷伯菌 枯草芽孢桿菌基因缺失突變株 基因ORF 金黃色葡萄球菌基因敲除突變株 肺炎克雷伯菌基因敲除突變株
| 產品編號 | 產品名稱 |
| 敲除基因，減少枯草芽孢桿菌的細胞自溶以提高重組蛋白的的產量 |
研究人員以前期構建的可以表達角蛋白酶的工程菌株Bacillus subtilis WB600-ker為出發菌株，在不同的發酵階段，使用qRT-PCR技術對營養生長期作用的肽聚糖水解酶基因lytC、lytD、lytE、lytF、lytG、lytH、cwlC、cwlS及其相關轉錄調節因子sigD；原噬菌體相關肽聚糖水解酶基因xlyA、xpf、cwlA、pcfA；以及自食相關基因skfA、spbC的轉錄水平進行監測。結果顯示，在發酵中后期這些基因的表達都存在不同程度上調，這與枯草芽孢桿菌細胞自溶表型一致。其中，基因lytC、cwlC、sigD、xpf、pcfA、skfA、spbC上調幅度較為顯著，因此認為這是導致枯草芽孢桿菌細胞自溶的關鍵基因。研究人員以這7個基因作為敲除靶點，共構建127株自溶基因缺失菌株。其中xpf、lytC、pcfA和cwlC的多缺陷菌株B. subtilis BS?XLPC-ker的生物量較出發菌株提高了57%。接著，通過細胞染色、綠色熒光蛋白成像和細胞外核酸泄漏實驗證實了這一結果。最終在5 L發酵罐中表達測試目標角蛋白酶的活力是對照的1.46倍。另外，在B. subtilis BS?XLPC中也分別將納豆激酶和枯草蛋白酶E的活性提高1.50倍和1.43倍，進一步證實了策略的普適性。
參考文獻：
“Reducing cellular autolysis of Bacillus subtilis to improve keratinase production”（Chen et al., ACS Synth. Biol., 2023, 12(10): 3106-3133.）
鏈接：
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37677132/
編號：54643153464444 備案號：浙ICP備11028186號-1